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FARMACOLOG?A | Experimentaci¨®n con animales

Seis t¨¦cnicas europeas para ensayos de f¨¢rmacos evitar¨¢n usar 200.000 conejos

Una gran mayor¨ªa de f¨¢rmacos de administraci¨®n intravenosa deben ser sometidos, lote a lote, a una prueba que detecta contaminaci¨®n con agentes pir¨®genos, causantes de fiebre. La prueba m¨¢s utilizada desde hace 50 a?os se basa en inyectar el f¨¢rmaco en conejos y registrar cualquier cambio en el animal. La Comisi¨®n Europea anunci¨® recientemente que se han desarrollado seis nuevos tipos de ensayos m¨¢s eficaces, espec¨ªficos y baratos, que adem¨¢s "salvar¨¢n la vida hasta a 200.000 conejos al a?o", informa la Comisi¨®n. Algunos de estas pruebas ya se usan en laboratorios.

Una directiva europea de 1986 obliga a los estados miembros a buscar m¨¦todos de investigaci¨®n alternativos a la experimentaci¨®n con animales. Sin embargo, el Parlamento Europeo resalt¨® hace poco el "escaso progreso" hecho en este terreno. Los nuevos m¨¦todos para detectar agentes pir¨®genos en f¨¢rmacos por v¨ªa parenteral son una excepci¨®n.

Las pruebas se basan en el uso de gl¨®bulos blancos humanos como biosensores

Por ahora el uso de conejos para probar la seguridad de cada lote era ineludible. No basta con la esterilizaci¨®n, porque los agentes causantes de fiebre est¨¢n presentes incluso en microorganismos muertos. La ¨²nica alternativa a inyectar el f¨¢rmaco en los conejos era una prueba in vitro basado en la coagulaci¨®n de la sangre del cangrejo Limulus polyphemus -que no muere cuando se le extrae la sangre-. Pero este m¨¦todo detecta s¨®lo una clase de pir¨®genos, las endotoxinas, un constituyente de la pared celular de bacterias gram-negativas. Esto deja a los pacientes "a riesgo de otros agentes causantes de fiebre, como las toxinas gram-positivas, los virus y los hongos. Adem¨¢s est¨¢ basado en el sistema inmune de un artr¨®podo, que no puede proporcionar resultados del todo relevantes para humanos", explica la Comisi¨®n Europea.

Los seis nuevos m¨¦todos desarrollados son de laboratorio (in vitro). Se basan en el uso de gl¨®bulos blancos humanos, principalmente monocitos, como biosensores. Estas c¨¦lulas son las encargadas de liberar en el organismo los llamados pir¨®genos end¨®genos, sustancias que generan fiebre como respuesta defensiva ante un agente invasor (como el pir¨®geno ex¨®geno). Los nuevos tests simplemente detectan la presencia de los pir¨®genos end¨®genos en la sangre.

"El gran avance en la comprensi¨®n del sistema inmunol¨®gico humano en los ¨²ltimos 20 a?os es lo que ha conducido a estas pruebas. Los pir¨®genos end¨®genos son las mol¨¦culas mediadoras del organismo. Puede que haya m¨¢s de las que conocemos, pero las que conocemos son las importantes. Si las bloqueamos, no hay fiebre. Adem¨¢s se liberan a la vez, as¨ª que podemos medirlas todas con los nuevos m¨¦todos", explica Thomas Hartung, director del Centro Europeo para la Validaci¨®n de M¨¦todos Alternativos y coordinador del proyecto.

Los nuevos tests son sensibles a todos los pir¨®genos, no s¨®lo a las endotoxinas. Seg¨²n Hartung su proceso de validaci¨®n por parte de la comisi¨®n ya ha terminado, lo que permitir¨¢ su inclusi¨®n en la Farmacopea Europea -que establece los requisitos de control de calidad de f¨¢rmacos en Europa- como m¨¦todo general. Los resultados muestran que "podr¨ªan reemplazar completamente los tests en conejos", informa la Comisi¨®n.

En el desarrollo de los nuevos tests, con financiaci¨®n del V Programa Marco de Investigaci¨®n, han participado centros de investigaci¨®n, industrias y organismos reguladores, que est¨¢n "muy interesados" seg¨²n la Comisi¨®n, en que los ensayos lleguen al mercado. Por lo pronto estas pruebas ya se est¨¢n usando extensamente "para procesos de control, como medida adicional de seguridad o para f¨¢rmacos dif¨ªciles de probar muy espec¨ªficos. Por ejemplo, la FDA estadounidense ha aceptado ya uno de los tests para un f¨¢rmaco de Novartis", dice Hartung. Y Charles-River/Endosafe, la compa?¨ªa que comercializa las pruebas in vitro basados en la sangre del cangrejo, "ya ha comercializado el a?o pasado uno de los tests". Tambi¨¦n est¨¢ a punto un kit de sangre congelada para usar como reactivo.

En palabras de Philippe Busquin, comisario europeo de investigaci¨®n y desarrollo, "¨¦ste es un ejemplo de c¨®mo funciona el Espacio Europeo de Investigaci¨®n, desarrollando un entorno en que los resultados cient¨ªficos pueden ser r¨¢pidamente explotados y transformados en productos y procesos que mejoran la calidad de vida, la competitividad y el bienestar de los animales".

Conejos vivos utilizados para ensayos de seguridad de f¨¢rmacos.
Conejos vivos utilizados para ensayos de seguridad de f¨¢rmacos.JRC

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